小鼠固定器的使用方法
来源：未知 |发布时间：2021-05-29 14:26|点击:次
酒精性心肌病临床表型与扩张型心肌病极其相似,均以心室扩张、心肌功能降低为主要表现,但是发病机制截然不同。所以对于表型相同,但是发病机制不同的疾病,动物模型需要有针对性的应用。由于酒精性心肌病主要由饮酒导致,因此本研究基于饮酒这一特征,进行了酒精性心肌病模型的构建。本研究利用添加了乙醇的成分明确、能量平衡的Lieber-DeCarli流质饲料进行长期的喂养,成功构建了典型的心室扩张、室壁变薄和心室功能不全的酒精性心肌病小鼠固定器模型。
目前,酒精性心肌病模型主要以小鼠为主,也有利用犬等大动物制备模型的,但使用较少。由于小鼠的体型较小、繁殖能力强以及成熟的基因工程操作手段等原因,小鼠是使用最广泛的模型之一。关于酒精性心肌病模型,目前认为C57BL/6品系是最好的制备模型小鼠固定器品系,其它品系如BALB/6和DBA要么不食用含有乙醇的饲料,要么会出现大量的死亡现象。
酒精性心肌病小鼠模型制备方法主要分为乙醇灌胃法、乙醇饮水法和液质饲料喂养法三种。其中乙醇灌胃法是指将一定溶度的乙醇通过灌胃的方法直接注射到小鼠胃里面,由于模型制作一般需要较长的时间,长时间的灌胃对小鼠固定器的咽、食道会造成反复的创伤,操作不当还可能引起乙醇进入气管,死亡率高,还有的操作人员为了快速造模成功,短期内大剂量给予乙醇灌胃,引起急性肝损伤或者急性胃扩张,并且与临床上酒精性心肌病慢性发展过程不相符;乙醇饮水法,是指经乙醇加入到小鼠的日常饮水中进行酒精性心肌病造模的方法。这种方法操作简单,但是效果较差。
由于小鼠的个体差异,每只小鼠固定器的饮水量不同,所以会造成较大差异,其次乙醇在饮水瓶中经过几天的挥发,浓度也很难精准控制,因此,此方法的缺陷相对较大,造模成功率也不高,目前采用此方法造模的文献相对较少;第三种方法是液质饲料喂养法,这种方法是利用液体饲料喂养的方式进行模型的制备。其中液体饲料是通过蛋白质、脂肪、维生素以及矿物质等等按相应比例配制成粉末溶解而成的成分清楚、营养均衡的液体饲料,并且由于对照组较乙醇喂食组缺少了高能量的乙醇,利用麦芽糖糊精补充到对照组的饲料中,达到了饲料能量的均衡,使误差减少到最低。
此种饲料尽可能控制了所有会造成营养和能量误差的一种饲料,保证了实验的科学性,因此,这种方法也是目前国际上最流行一种制备酒精性心肌病模型的方法。尽管液质饲料制备酒精性心肌病模型已经被普遍接受,但是乙醇浓度和造模周期并未统一,乙醇浓度从4%到10%,甚至有研究利用20%乙醇浓度进行短暂喂养,喂养过程中有的研究利用统一的喂养浓度,有的研究则采取了设置乙醇浓度梯度的喂养方式;由于乙醇浓度和喂养方式的不同,小鼠固定器喂养周期也相差很大,总体来看最短的喂养时间是8周,而最长周期达到16周龄。
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