实验小白鼠固定架的临床使用
来源：未知 |发布时间：2021-05-14 09:36|点击:次
结果
1、组织标本基本情况
本研究收集22例ESCC组织标本,其中,第1号病例即为ES01,第2号病例为ES02,以此类推。实验小白鼠固定架22例病例包括年龄在45~78岁之间的男性17例,女性5例,病例中位数年龄为67岁。I期1例,I期9例,期12例,IV期0例。对ESCC癌患者临床参数(年龄.性别、病理分期分化程度和淋巴转移情况)与NSG小鼠和BALB/c裸鼠移植瘤模型是否成功进行统计学分析,结果显示:年龄、性别、病理分期、分化程度及淋巴转移这些因素与NSG小鼠移植瘤成瘤率无明显相关性。在BALB/c裸鼠中,年龄、性别、病例分期、分化程度与BALB/c裸鼠移植瘤成瘤率无明显相关,淋巴结转移情况对BALB/c裸鼠的移植瘤成瘤率有显著影响(P=0.03)。
2、NSG实验小白鼠固定架P1代模型成瘤情况
22例患者标本接种到NSG小鼠后背部皮下,其中有11例标本的P1代小鼠移植瘤在4个月内体积可约达1000mm,提示移植瘤成功,NSG小鼠P1代移植瘤成瘤率为50%(11/22)。在移植后平均75.95d,移植瘤体积可达到250mm大小，即NSG小鼠P1代成瘤时间平均为75.95d。
3、BALB/c裸鼠P1代模型成瘤情况
22例患者标本接种到BALB/c裸鼠后背部皮下，其中有4例标本的P1实验小白鼠固定架移植瘤在4个月内体积约达1000mm,提示移植瘤成功，BALB/c裸鼠P1代移植瘤成瘤率为18.18%(4/22)。在接种平均91.67d后,移植瘤体积可达到250mm大小，即NSG小鼠P1代成瘤时间平均为91.67d。
4、NSG小鼠和BALB/c裸鼠成瘤情况的比较
在不同宿主小鼠中,NSG实验小白鼠固定架P1代肿瘤长至250mm2平均需要75.95d,比BALB/c裸鼠(平均91.67d)所需时间更短(P<0.001)。NSG鼠的成瘤率(50%)高于BALB/c裸鼠(18.18%),差异具有统计学意义(P-0.027)。在BALB/c裸鼠移植成功的原代病人肿瘤组织标本在NSG小鼠中均能够成瘤,且同一例组织标本在NSG小鼠体内的成瘤时间明显快于BALB/c裸鼠。
5、P1代NSG小鼠与BALB/c裸鼠模型移植瘤的病理学检查
H&E染色结果显示，与原匹配的患者肿瘤组织相比,NSG实验小白鼠固定架和BALB/c裸鼠P1代移植瘤的病理形态均与患者组织形态相似。免疫组化Ki67和P53染色结果也表明,NSG与BALB/c小鼠P1代移植瘤与患者肿瘤组织均有相似阳性表达。
6、P1代NSG小鼠与BALB/c裸鼠模型移植瘤的基因测序
与亲代患者肿瘤基因突变数相比,NSG小鼠PDX模型与患者肿瘤重合基因数为98.34%,BALB/c裸鼠PDX模型与患者肿瘤重合基因突变数为83.34%。
测序结果表明NSG小鼠的肿瘤与原代患者肿瘤间的基因相似度更高。
讨论
ESCC是一种高度侵袭性肿瘤,晚期患者预后较差,治疗方法有限。因此,开发有效的临床前的模型迫在眉睫。本研究探索不同品系实验小白鼠固定架对动物模型的影响因素,对构建成瘤率更高,成瘤时间更短的临床前PDX动物模型具有重要意义，为ESCC患者的个体化治疗及药物研究评估与筛选提供了良好的平台。
PDX模型能稳定地保持原代肿瘤中的病理特征、肿瘤微环境和异质性,成为药物开发的优选的临床前工具,但其移植成功率和小鼠品系相关。不同小鼠品系免疫缺陷程度不同。常用的免疫缺陷鼠有:NOD/SCID小鼠,缺乏几乎所有类型的免疫细胞;其次是缺乏B细胞和T细胞的SCID实验小白鼠固定架;然后是无T细胞的无胸腺裸鼠。
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