啮齿类动物手术器械、小鼠开口器
产品名称：啮齿类动物手术器械、小鼠开口器
规格：小鼠
生产厂家：ERBRIGH-INSTRUMENTE
供应商：河南宜慧康科技有限公司
产品型号：40E-017
产地：德国
产品用途：进行一些口腔检查或者牙病治疗时；同时用于昏迷，须张口的特殊检查及呼吸道阻塞引起的窒息。在紧急急救时打开患者牙关紧闭的上下颚。
为扩增登革病毒，使用1mL胰岛注射器(BD:328421)吸取20μLNewGuinea病毒液,颅内接种2日龄BALB/c乳鼠(病毒浓度:8x10°Copies/μL)。观察8~9d,出现麻痹、抽搐瘫痪等中枢神经系统症状,则安乐处死动物。采取鼠脑,研磨;3500r/min离心15min,吸取上清冻存于-80°C冰箱。为建立小鼠模型,使用1mL胰岛注射器吸取100μLNew
Guinea病毒液,尾静脉接种Ifnar1-/-小鼠(病毒浓度:8x10°Copies/μL)。在感染后第4天(4DaysPostinfection,Dpi.4)采取组织样本,直接冻存于-80℃冰箱;Dpi.2、4、6、8采取血液样本,3000r/min离心10min,吸取上清冻存于-80%C冰箱。小鼠开口器。
1.3.4病毒核酸的提取
本实验操作在生物安全二级实验室(BSL-2)的生物安全柜内进行,操作步骤参见试剂盒说明书。简单地,1.5mLEP管内预置560μL病毒裂解液，加入140μL样本;静置10min,充分裂解。再加560μL无水乙醇,混匀;转移至2mL收集柱内,8000r/min;加500μLAW1,8000r/min;加500μLAW2,14000r/min;空离14000r/min;换新的1.5mLEP管;加40μLAVE,8000r/min;重复上一步骤。4C保存继续下一步实验,或冻存于-80°C冰箱。小鼠开口器。
1.3.5一步法实时荧光定量PCR反应
根据表1,配制实时荧光定量PCR反应体系;根据表2,设定反应程序,共40个循环。
1.4统计学方法
实验中得到的数据使用SPSS统计软件进行统计分析,NGC株与NGC适应株感染的小鼠样本重复三次检测,计算各组数据Ct值的标准差(Standarddeviation,SD)和变异系数(CoefficientofVariation,CV)。
Guinea病毒液,尾静脉接种Ifnar1-/-小鼠(病毒浓度:8x10°Copies/μL)。在感染后第4天(4DaysPostinfection,Dpi.4)采取组织样本,直接冻存于-80℃冰箱;Dpi.2、4、6、8采取血液样本,3000r/min离心10min,吸取上清冻存于-80%C冰箱。小鼠开口器。
1.3.4病毒核酸的提取
本实验操作在生物安全二级实验室(BSL-2)的生物安全柜内进行,操作步骤参见试剂盒说明书。简单地,1.5mLEP管内预置560μL病毒裂解液，加入140μL样本;静置10min,充分裂解。再加560μL无水乙醇,混匀;转移至2mL收集柱内,8000r/min;加500μLAW1,8000r/min;加500μLAW2,14000r/min;空离14000r/min;换新的1.5mLEP管;加40μLAVE,8000r/min;重复上一步骤。4C保存继续下一步实验,或冻存于-80°C冰箱。小鼠开口器。
根据表1,配制实时荧光定量PCR反应体系;根据表2,设定反应程序,共40个循环。
1.4统计学方法
实验中得到的数据使用SPSS统计软件进行统计分析,NGC株与NGC适应株感染的小鼠样本重复三次检测,计算各组数据Ct值的标准差(Standarddeviation,SD)和变异系数(CoefficientofVariation,CV)。
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