人工修复兔桡骨骨缺损的结果
来源：未知 |发布时间：2023-02-02 10:12|点击:次
人工修复兔桡骨骨缺损的结果
一、慢病毒包装
以慢病毒Lenti⁃HIF⁃1α⁃eGFP和Lenti⁃Pac HIV混合包装质粒为载体成功感染293T细胞，收集、浓缩、量化，得出病毒滴度为7.8×10⁹IU/ml。
二、兔BMSCs的鉴定
经全骨髓贴壁法原代培养获得的兔BMSCs，细胞生长状态良好，有生长晕，立体感强，细胞生长达90%融合时，表现为平行或漩涡状分布。在倒置显微镜下，BMSCs形态均一，呈梭形。
流式细胞仪检测结果显示第3代BMSCs表面强表达特异性抗原CD90、CD105（阳性率为99.3%），不表达造血干细胞表面特异性抗原CD34、CD45，表明BMSCs培养成功。
三、慢病毒载体感染BMSCs的效率
用50 MOI病毒感染BMSCs，48 h后，倒置荧光显微镜下观察，约有80%细胞荧光表达呈阳性，表明细胞的感染效率为80%左右。
四、实验兔的一般情况
所有实验动物的桡骨中段缺损模型均构建成功，每组动物术后一周活动较少，1周后活动、饮食均恢复正常，精神状态活跃，伤口愈合良好，皮下和肌肉组织无充血、肿胀、渗出、伤口感染，植入材料无裸露，正常肢体活动较好，无跛行，无实验动物死亡。
五、大体标本形态观察
术后12周获得3组兔的桡骨标本。实验组材料完全降解，被骨痂及骨组织填充，形成骨性连接，表面连续平整，骨缺损基本修复；对照组材料部分降解，缺损区充满骨痂组织，与正常骨组织连接较紧密，界面不明显，骨缺损部分修复；空白组可见两断端骨质硬化，未见明显骨痂生长，与尺骨部分连接，骨缺损未能得到修复。
六、X线表现
1.实验组4周时材料部分降解，薄云雾状阴影出现在正常骨组织连接处，边界变模糊，周围骨痂形成量多；8周时材料大部分降解，与骨质交界处结合更紧密，分界不清、模糊，并可见较高密度骨痂影，大量骨痂生成，新骨向中央处生长；12周时材料完全降解，长出新生骨组织，骨髓腔再通，骨折线融合，骨缺损基本修复。
2.对照组4周时材料少部分降解，与正常骨组织边界模糊，有小片的云雾状阴影，骨痂形成量少；8周时材料降解不多，骨缺损部位连接少量骨痂；12周时材料部分降解，边界模糊，缺损区形成分布不均匀的连续性骨痂，骨髓腔部分再通，骨缺损处部分修复。
3.空白组12周时骨缺损区无骨性连接，仅见断端少量骨痂样阴影，部分与尺骨相接，形成骨不连，骨髓腔未通，骨缺损未能修复。
七、组织切片表现
1.实验组植入材料完全降解，皮质骨形成，分布稍不规则，可见大量成骨细胞及少量纤维结缔组织，骨髓腔重新贯通，可见部分骨髓组织生成，有多量脂肪组织，骨缺损基本修复。
2.对照组植入材料部分降解，少量新生骨组织填充缺损区，骨髓腔未完全形成，缺损部分修复。
3.空白组骨缺损区仅有少量骨痂及纤维结缔组织生成，髓腔两端封闭，骨缺损未能修复。
讨论
一、HIF⁃1α基因在骨缺损修复中的成骨作用
HIF⁃1α是HIF⁃1的活性亚基，同时又作为HIF⁃1的调节亚基，其空间构象稳定性及其转录活性与细胞内氧浓度有关。作为一种非常有效的细胞因子，HIF⁃1α通过调控其下游基因的表达，促进血管生成、加速成骨细胞的转移，并提供养分促使干细胞成骨分化。HIF⁃1α可直接或间接促进成骨因子（如BMP2）生成，促进血管内皮细胞的黏附和新生血管形成，促进BMSCs的细胞增殖和分化，在骨缺损的成骨细胞修复过程中发挥重要作用。
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