大鼠固定架在临床的使用
来源：未知 |发布时间：2021-04-16 14:49|点击:次
碘乙酸致大鼠固定架膝骨关节炎疼痛模型的实验研究
骨性关节炎(osteoarthritis ,0A)是一种复杂的多病因退变性关节疾病。其典型特征是关节软骨退变,软骨降解、关节局部炎症、软骨下骨硬化、韧带和关节腔退变等一系列退行性病变，最终引起关节疼痛、僵硬、失用等行为功能障碍。目前临床尚无满意的治疗方法，而疾病晚期外科手术是唯一-的治疗手段。因此,早期进行0A防治尤其重要。但获取足量适合研究的早期0A人类骨标本较为困难。因此，动物模型在研究早期0A病程变化中起到重要作用。关节疼痛、僵硬是0A的主要症状，通过建立关节疼痛动物模型是研究0A病理机制、治疗及预防的必要手段，而现有的OA动物模型并不能反映关节疼痛的变化，通过动物关节腔注射碘乙酸溶液是目前最适合研究疼痛0A模型最合适的方法。但是目前尚无统一的碘乙酸 模型的剂量标准。本实验通过大鼠固定架膝关节腔内注射不同浓度碘乙酸溶液,探究碘乙酸致大鼠OA的浓度及时间规律。
1实验材料
1.1动物清洁级雄性SD大鼠72只,体质量为( 200+10)g,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供[实验动物生产许可证号:SCXK(沪)2017-0005],
并由浙江中医药大学实验动物中心[SYXK (浙)2018-0012]饲养。饲养期间给予啮齿类动物标准颗粒饲料及自由饮水,控制温度(23+2 )C和湿度60%,12h循环灯光。实验过程中对动物的处置符合2006年科技部发布的《关于善待实验动物的指导性意见》,所有操作均符合实验动物伦理学要求(伦理审批号:IACUC-20190909- -26)。
1.2 试剂生理盐水(规格:2.5mL)、碘乙酸(规格:25g,批号64- -69-7);4%多聚甲醛(规格:500mL,批号BL539A)、EDTA脱钙液(规格:500mL,批号R20403- -500mL)、水合氯醛(规格:250g,批号302-17-0)。
1.3 仪器
微量注射器:(型号:Model710NSYR)、电子机械痛仪（型号:YLS- -3E),足底热辐射测痛仪(型号:37370)、大鼠固定架抓力仪(型号:ZS000012)、荧光倒置显微镜(型号:AXiovert200)。
2实验方法
2.1动物分组及造模72只SD大鼠适应性饲养1周后按照随机数字表法分为对照组及碘乙酸低、中、高浓度组,各18只。将实验动物用10%的水合氯醛溶液以0.3mL/100g的剂量腹腔注射实施麻醉后,膝关节脱毛、消毒。一手使膝关节屈曲 90°,另一手触摸找出股骨髁、髌骨及髌韧带。微量注射器针头紧靠髌韧带两侧髌骨下方对准股骨髁方向进针，当感到明显的落空感时即已进人关节腔内。对照组双侧膝关节各注射50uL生理盐水,碘乙酸低、中、高浓度组大鼠固定架每侧膝关节分别注射1、3.6mg/50uL的碘乙酸溶液(超纯水配置)50_uL-12]。操作完成待大鼠苏醒后放回笼内饲养。
2.2一般形态观察及取材造模后第 1、7、14、21、28、35天后观察大鼠一般情况,测量热痛值、机械痛值。每次测量后碘乙酸低、中、高浓度组各随机处死3只大鼠固定架,处死后截断双侧胫骨、股骨中部,取一侧膝关节进行常规组织石蜡切片、SO染色，显微镜下观察软骨组织学特征,另一侧膝关节取股骨,去除关节周围软组织，充分显露关节面并观察比较关节面组织形态学表现变化。
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