啮齿类动物手术器械有哪些？
来源：未知 |发布时间：2021-04-12 09:48|点击:次
c-Jun氨基末端激酶信号通路在血管紧张素II诱导腹主动脉瘤小鼠模型中的作用机制研究
腹主动脉瘤( abdominal aortic aneurysm, AAA )是一种常见的老年，人动脉退行性疾病。目前尚无有效的治疗药物,动脉瘤切除、人工血管置换术和腔内覆膜支架修复术等外科手术是临床治疗AAA的主要手段，但术后并发症的发生不仅严重影响患者生活质量,并给患者带来沉重的经济负担。
AAA具体发病机制尚不清楚，研究表明血管壁慢性炎症反应、基质金属蛋白酶( matrixmetallproteinases, MMPs)活化、血管平滑肌的细胞凋亡和表型转换、过度氧化应激等生理过程均参与AAA发生、发展。最近的研究表明如何降低血管炎性反应、增加巨噬细胞对破损血管机械修复是治疗AAA的一个新方向。肾素_血管紧张素系统( renin angiotensin system, RAS)在心血管疾病发展过程中扮演重要作用4),也是调控AAA形成的主要因素之一。
研究表明血管紧张素I(angiotensin II ,AngIl )参与调控血管内皮功能紊乱、白血球渗透、炎性反应、蛋白酶引起的细胞外基质蛋白降解和血管氧化应激等生理过程,可通过影响血管功能,从而促进AAA形成;c-Jun氨基端激酶(c-Jun NH2-terminal kinase, JNK )是细胞内与AngII密切相关的信号分子,可被细胞应激刺激和肿瘤坏死因子激活，激活的JNK通路通过调控磷酸化水平或细胞骨架相关蛋白因子或调控相关蛋白酶及底物的表达,参与热休克、氧化损伤等多种生理过程。但JNK信号通路是否参与调控腹主动脉瘤形成及其机制尚不清楚。本实验通过Ang II灌注诱导建立小鼠腹主动脉瘤模型,在此基础上采用JNK抑制剂SP600125进行干预治疗,探讨JNK信号通路对腹主动脉瘤中发生发展的影响,深人研究其机制及寻找新的治疗靶点具有重要的理论价值。
1材料和方法
1.1实验 动物
12~15周龄的SPF级C57BL/6 ApoE-- ( ApoEknock out, ApoE KO)雄性小鼠,共计36只，体重在100g~150g,由北京协和医学院基础动物实验中心提供[ SYXK(京)2015-0025]。依照我院最新的动物实验管理办法,实验动物均在本实验室SPF级动物房饲养[SYXK(豫)2017-0015] ,适应性喂养一周后人组,进行相应的操作。在实验过程中,在3R原则的指导下给予实验动物人道主义关怀,并参照本院动物管理伦理委员会的相关规定有序进行,伦理编号( IACUC2020-027)。
1.2 主要试剂与仪器
羊抗大鼠3-磷酸甘油醛脱氢酶抗体( glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase , GAPDH);蛋白免疫印迹( Western blot) 试剂盒(生产批号:2017- 245KM);细胞裂解液(生产批号:5234kL-31);血管紧张素I( Ang II ,生产批号:S10950163 );JNK抑制剂SP600125(生产批号:45G099S);磷酸化JNK(p-JNK,生产批号: B785G-4 M)抗体; BCA蛋白浓度测定试剂盒(生产批号:BJ787420-M)、DAB化学发光试剂盒(生产批号:BJ7873560-M);二醇( MDA)检测试剂盒(生产批号:JGKK743 A-M)、超氧化物歧化酶( SOD)(生产批号:JGKK7404A-M)检测试剂盒和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)检测试剂盒(生产批号:JGKK7255 A-M) ;双氯荧光素(2',7'dichlorfluorescein-diacetate, DCFH-DA)染色试剂盒(生产批号:DYZ40-3 M)。
CellInsight激光共聚焦显微镜; E-Gel Imager凝胶成像仪;DM2500生物显微镜; Ang I的痕量缓释泵(0.1ML/34DB);生理盐水微量缓释泵(1 mL/JK78) ; Multiskan MK3酶标仪(987 - 4BF);- 80C冰箱。
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