啮齿类动物手术器械的价格贵吗？
来源：未知 |发布时间：2021-04-07 09:55|点击:次
tTA/tetO-CCKR-2双转基因模型小鼠鉴定及生存时间分析
焦虑症已经成为当今人类社会最常见的精神疾病之，其遗传及分子机制的阐明需要相关的体外和体内实验模型，而利用动物模型来探究其发病机制及相关临床前药物疗效、代谢、毒理等作用已得到广泛认可并体现出不可替代的优越性。
因此，动物模型的制作、选择、繁殖、饲养，以及包括自然寿命在内的生命体征等揭示都很必要。胆囊收缩素(cholecystokinin, CCK) 是能对人类焦虑反应产生复杂影响的一种神经肽类物质，与焦虑症、恐惧行为、急性应激障碍等相关疾病都有着密切的联系。
近年，涉及分布于神经系统的胆囊收缩素受体2(cholecystokinin receptor2, CCKR-2) 被认为与焦虑症、恐慌症等相关性甚高。CCK 在中央杏仁核(CeA)中通过CCKR-2传导信号，可以双重调节炎症反应性疼痛和焦虑相关行为。
另外，CCK-4 作为CCKR-2激动剂，可能会促进恐慌焦虑的发生，且与剂量呈正相关。焦虑障碍的临床诊治中，能拮抗CCK-2受体的药物被认为是具有很大治疗潜力和研究价值的药物。前期已成功构建tTA/tetO-CCKR-2tg小鼠其作为焦虑症的一种遗传动物模型，表现出明显且稳定的焦虑行为学特征，其前脑中CCK-2受体结合能力显著提高，可能参与了焦虑表达的神经分子机制。
因此，此次研究对象dtg小鼠是焦虑症相关疾病的理想动物模型，而模型的成功构建、繁殖与正确饲养可为相关疾病机制的揭示等奠定重要实验基础。
由于前期研究中的直接造模方法复杂且成本高图，而动物交配繁殖作为后期实验造模方式的一种，能简化操作、节约时间及经费等。因此，此次研究通过对dtg小鼠繁殖子代进行基因型鉴定和组织学定位，以确认该模型在实验室的成功建立。
由于焦虑常被抑郁表现掩盖，而焦虑对某些疾病的影响比抑郁更大。焦虑及抑郁的患病率女性均高于男性且可能缩短人类寿命，特别是有基础疾病的患者。抑郁护理治疗可改善患者症状和生活质量，但尚缺乏足够的证据表明其对生存率有显著影响。
另外，正常近交系小鼠生活能力较正常野生型小鼠弱，寿命可能缩短。因此，对鉴定符合的dtg小鼠进行生存寿命观察和分析十分必要，为进一步繁育及选择该模型进行焦虑症、恐惧行为、创伤后应激障碍等研究的实验时间设计等提供有益参考。
1材料和方法Materials and methods
1.1设计分组对照动物实验。
1.2时间及地点实验动物繁育、饲养于西南医科大学SPF实验动物中心屏障动物房完成。
1.3材料.
1.3.1实验动物实验所用亲代动物为以B6/CBAF1为遗传背景(品系)的双转基因SPF级小鼠，其构建是利用tTA依赖系统诱导CCKR-2基因前脑特异性表达的tTA/tetO-CCKR-2双转基因小鼠，由a-CaMlI/tTA单转基因小鼠和tet0-CCKR-2单转基因小鼠杂交所得回。
子代dtg小鼠繁殖。实验中寿命观察动物包括基因型鉴定和组织学定位均符合的实验组dtg小鼠雌、雄各30只;野生型对照组小鼠(简称WT小鼠)雌、雄各30只。实验方案经西南医科大学实验动物伦理委员会批准。
1.3.2实验条件动物繁育标准条件: 控制在室温21-23 C,湿度75%,每间隔12 h进行1次光照循环，期间随意饮水进食。标准小鼠笼饲养，每笼小于4只，混合饲养过程中若发现小鼠状态异常及打架受伤等情况，及时隔离饲养，尽可能避免意外伤害对小鼠自然生存时间的影响。高温高压灭菌消毒所有饲养所需物品:每间隔3d进行1次垫料、饮水及鼠笼的更换，每次供应足够的饮水及饲料。按实验动物使用3R原则给予人道的关怀。
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