进口小鼠固定架的临床使用
来源：未知 |发布时间：2021-05-24 14:34|点击:次
M型和B型超声
对实验小鼠固定架应用Vevo2100小动物超声成像仪配合MS-400探头进行B型和M型超声测量。采用已报道的方法进行超声检测,使用1.5%异氟烷混合气体对小鼠麻醉,取仰卧位保定,探头切迹朝向小鼠右肩与中线成约30°取得水平位胸骨旁左室长轴B型图;顺时针旋转探头约90°,获得乳头肌平面的胸骨旁左室短轴B型图,同时放置M型超声光标,获得左室M型超声图像。记录室间隔收缩末期厚度(interventricularseptumthickness,endsystolic,IVS;s),室间隔舒张末期厚度(interventricularseptumthickness,end-diastolic,IVS;d),左室收缩末期内径(leftventricularinternaldimension,end-systolic,LVID;s),左室舒张末期内径(leftventricularinternaldimension,end-diastolic,LVID;d),左室收缩末期后壁厚度(leftventricularposteriorwall,endsystolic,LVPW;s)和左室舒张末期后壁厚度(leftventricularposteriorwall,enddiastolic,LVPW;d)。计算反映左室收缩功能指标包括射血分数(ejectionfraction,EF)和短轴缩短率(shortaxisfractionalshortening,FS)。小鼠固定架。
1.2.5二尖瓣血流和组织多普勒频谱采集
采集二尖瓣口血流和二尖瓣环组织多普勒频谱用于评价心脏舒张功能。将探头移动到胸廊的外侧壁水平放置,得到心尖四腔切面。将多普勒取样容积光标放置在二尖瓣瓣尖上方获得二尖瓣口舒张早期血流E峰值速度和舒张晚期血流A峰值速度,等容收缩时间(isovolumetriccontractiontime,IVCT),等容舒张时间(isovolumetricrelaxationtime,IVRT),和射血时间(ejectiontime,ET)。使用如下公式计算心肌功能指数(myocardialperformanceindex,MPI):MPI=(IVCT+IVRT)/ET。同时,在标准心尖四腔心切面,选取组织多普勒模式显示完整二尖瓣环结构,容积光标至于左室前壁处获得二尖瓣环运动频谱。测量可获得舒张早期瓣环e,峰值速度和舒张晚期瓣环a,峰值速度。
1.2.6病理学评价
采集0、2、4、8周组小鼠固定架心脏样本,置于4%多聚甲醛溶液中固定24h,取心脏进行石蜡包埋,4μm厚度切片,HE染色观察心肌细胞形态改变,天狼猩红染色分析心肌纤维化程度。
1.3统计学分析
数据采用平均值±标准差(x¯±s)表示。采用多功能数据图像分析软件GraphPadPrism7进行统计分析。结果采用One-wayANOVA单因素方差分析及Tukey’s检验比较0、2、4、8周组之间的指标值的差异。P<0.05认为差异具有统计学意义。
2结果
2.1主动脉弓缩窄诱导左室压力超负荷
血流多普勒用于检测血流速度流向及速度。在造模前0周和造模后2、4、8周对小鼠主动脉弓缩窄部位进行测量。超声结果显示,与0周组相比,2、4、8周组小鼠主动脉弓缩窄部位血流速度和压力均显著性增加。
2.2小鼠固定架心衰病理进程中心脏结构的改变
胸骨旁B型长轴和短轴以及M型超声显示造模后2、4、8周心脏结构发生显著性的阶段性改变。
与造模前0周组相比,造模后2周心脏室间隔和左室后壁在收缩和舒张末期均显著性增厚,而左室内径显著性缩小,表现为代偿性心肌肥厚的结构特征。随着疾病进程进入过渡期,造模后4周的心脏室间隔和左室后壁收缩末期的代偿性肥厚消失;同时,左室内径开始扩大,指标值由显著性缩小恢复到与造模前0周组一致。
当疾病发展至第8周时,室间隔和左室后壁进一步变薄,与2周组和4周组比较均有显著性差异,在收缩期甚至显著性低于造模前0周组、在舒张期与造模前0周组接近;第8周内径进一步扩大,与2、4周均有显著性差异。第8周的心脏结构结果指示了扩张型心衰的结构特征。小鼠固定架。
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