啮齿类动物手术器械的费用贵吗？
来源：未知 |发布时间：2021-03-26 09:18|点击:次
模型制备
在应用诱癌剂24 h前，使用一次性备皮刀将所有小鼠背部剔除约4 cm2 的毛发使得皮肤裸露。A组:在小鼠背部涂抹1mol/L的DMBA丙酮溶液.0.2mL,每次实验使用DMBA200nmol,然后将小鼠固定于直径10cm的敞口密闭容器内,待其背部试剂完全吸收后,将小鼠放回笼内;B组:在小鼠背部涂抹0.5 mol/L的DMBA丙酮溶液0.2 mL,每次实验使用DMBA 100 nmol,后将小鼠固定于直径10 cm的敞口密闭容器内,待其背部试剂完全吸收后,将小鼠放回笼内;C组:正常饲养,不做任何处理。以上操作每周重复3次，整个实验周期为12周。
1.5 数据收集
每周使用数码相机拍摄小鼠背部皮损;使用电子天平计量每只小鼠的体重变化;使用电子游标卡尺记录直径≥1 mm且持续时间≥2周的新生皮肤肿瘤数目及肿瘤体积变化,肿瘤体积按公式V=1/2ab'(a为肿瘤最大直径,b为垂直a的直径)进行计算。
1.6病理及免疫组化染色观察
实验结束后,使用颈椎脱臼法处死小鼠，将皮肤标本固定在10%中性福尔马林溶液中,依次进行石蜡包埋固定,HE染色。并另取石蜡切片进行免疫组化染色。在光学显微镜(Nikon DS Ril)下观察病理切片,统计各组小鼠SCC发生率。
1.7免疫组织化学结果处理
对免疫组织化学结果用Image-Pro Plus 6.0 (IPP)进行定量分析。随机选择皮肤组织标本的3个显微视野,用IPP(光密度校正值为0~200)计算PCNA染色的积分光密度(IOD)和阳性面积,将分析结果作为阳性染色的表达水平。较大的IOD和阳性面积值表示较强的抗原表达。
1.8 统计学处理
用SPSS22.0软件进行统计分析,各组数据用均值士标准差(x士s)表示。采用单因素方差分析(One-way ANOVA)和Fisher的最小显著性差异法(LSD)对数据进行配对多重比较,两两比较采用LSD-t法。P<0.05为差异具有统计学意义。
2结果
2.1一般观察
用DMBA处理的小鼠背部皮肤2周后,A.B两组小鼠备皮边缘处毛发出明显的脱失,在红斑的基础上伴有不同程度的溃疡、渗出和结痂,皮损在几周内趋于稳定。相较于C组小鼠,A.B两组小鼠皮肤更为皱褶、触之无弹性、缺乏光泽,至第5周时，A.B组小鼠皮肤上的痂已完全脱落，仅有红斑残留。第6周时,A组小鼠红斑皮肤出现粟粒状丘疹，随后出现直径大于1 mm的肿瘤,至第12周,肿瘤数量逐渐增多,肿瘤体积逐渐增大,部分肿瘤相互融合;B组小鼠相较于A组小鼠肿瘤发生的更晚,肿瘤体积更小且没有相互融合。
2.2小 鼠体重
A.B两组小鼠在持续接触诱癌药物后体重呈下降趋势,而后缓慢增长;C组小鼠体重持续增长，并趋于稳定。经12周实验,3组小鼠体重比较有统计学差异(F=30.972,P<0.01),且A.B两组小鼠体重相互比较无统计学差异(t= 1.232,P>0.05)。
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