啮齿类动物手术器械实验小鼠固定架的价格贵吗
来源：未知 |发布时间：2021-03-30 09:12|点击:次
非酒精性脂肪性肝炎小鼠模型的建立
非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholicfattyliverdisease , NAFLD)是指除酒精和其他明确的损肝因素外所致的以肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的临床病理综合征,包括单纯性脂肪肝炎(simpleftyliver, SFL)、非酒精性脂肪性肝炎( nonalcoholicsteatohepatitis , NASH)及相关肝硬化。NASH 是NAFLD疾病谱中的最重要组成之一,是NAFLD进展至肝硬化和肝细胞癌的重要环节,因此建立动物模型探讨NASH发生发展机制及寻找有效干预药物尤为重要。目前高脂饮食所致NASH的动物模型多有报道,但造模周期平均为3~5个月,甚至长达1年,无法满足药物高通量和快速筛选的需求。近年研究发现NAFLD发展机制的重要环节:肠肝轴,即肠道、肝脏和血液代谢之间的相互作用探讨给予调控NAFLD的进程。本实验采用不同浓度葡聚糖硫酸钠( dextransulfatesolin, DSS )对结肠造成不同程度的损伤,短期内成功再现NASH的动物病理模型。
1材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 雄性昆明小鼠80只,4 ~6周龄,体质量( 18+2)g,由三峡大学实验中心提供，SPF级环境饲养。于恒温( 20+2)C及湿度(50+2)%条件下,人工照明明暗各12 h,适应性哏养2 d后随机分组。
1.1.2试剂DSS,相对分子量为(36 ~ 50)x10 ;胆固醇;总RNA提取试剂盒和逆转录试剂盒;PCR引物。
1.1.3动物饲料普通饲料由三峡大学实验动物中心提供。高脂饲料配方为普通饲料53.5%、果糖20%、猪油20%、胆固醇5%、食盐1%、胆酸钠0.5%,混合固定成形,送至武汉农科院辐照灭菌备用10。
1.2 方法
1.2.1 动物饲养及分组 80只昆明小鼠随机分为8组,每组10只,对照组给予普通饲料及正常饮水，2%DSS组、2.5%DSS组、3%DSS组给予普通饲料，HFD组2% DSS+HFD组、2. 5% DSS+HFD组、3%DSS+HFD组高脂饲料喂养。饲养1周后,饮水均换成相应浓度DSS溶液,连续自由摄入5 d,共观察2周。
1.2.2肝脏、结肠组织病理检测及肠道组织学评分肝脏、结肠组织按常规方法进行石蜡包埋、切片和HE染色;取新鲜肝脏组织进行冰冻切片，按试剂盒说明进行油红染色,光镜下观察。由2名实验人员独立阅片并评分,总评分为上皮细胞和炎症细胞浸润评分总和(总评分=E+I)。
1.2.3RT-PCR检测小鼠肝脏组织中碳水化合物反应元件结合蛋白( carbohydrate response element,binding protein , chREBF)、IL-6 的表达称取冻存肝脏组织50 mg,用Trizol法提取组织总RNA,微量核酸仪测定RNA浓度,经逆转录试剂盒逆转录得到cDNA,逆转录体系按照试剂盒说明书操作,采用RT-PCR法检测各组肝脏组织中脂质代谢相关基因chREBF以及炎症相关基因IL6的表达情况。
1.3统计学处理实验 数据采用SPSS22. 0、Image J和GraphPad7.0进行分析,数据以x士s表示,用单因素方差分析组间数据,以P<0.05为差异具有统计学意义。
此文字最终解释权归河南宜慧康科技有限公司所有：详情请咨询河南宜慧康科技有限公司。
上一篇：进口宠物医疗器械的使用效果怎么样
下一篇：进口宠物医疗器械真的好吗？
