进口宠物医疗器械的使用效果怎么样
来源：未知 |发布时间：2021-03-30 09:16|点击:次
肺癌人源性异种移植小鼠模型库的建立
近年来快速发展的人源性异种移植( PDX)小鼠模型为上述问题提供了较好的解决办法。PDX模型可保持原代肿瘤的分化程度形态结构及生物学特征,可以实现为患者同时进行多种药物及药物组合的用药方案评价,从而确定最准确最适当的个性化用药方案。虽然国外已有多篇文章证明肺癌PDX模型的临床应用价值,但目前在国内尚无规模性的亚裔人群肺癌PDX模型库。由于中国人群的肺癌突变图谱与欧美差异明显，因此,建立规模性的中国人群肺癌PDX模型库并对其进行生物学特性研究对中国人群肺癌的新药研发及个性化医疗尤为重要。
材料与方法
1.材料:4~6周龄无特定病原体(SPF)级雄性.NPITM( NOD-Prkde- -I21g)小鼠(1200只,体重20 g)购自北京艾德摩生物技术有限公司。所有肺癌样本来自于北京大学人民医院胸外科手术取材,样本获取与患者沟通后并签署知情同意书进行。本实验通过北京大学人民医院实验动物中心伦理委员会的批准。
2.样本处理:将手术中取得的新鲜肺癌肿瘤样本根据大小转至35mm或60mm无菌培养皿中,加入适量含1%双抗的磷酸盐缓冲液( PBS)进行清洗。用手术刀片将肿瘤样本按每块3 mm x3 mmx3 mm大小进行切割,并在48 h内进行小鼠皮下移植实验。
3.原代肿瘤组织移植小鼠:小鼠经过腹腔注射麻醉剂并确认麻醉后,用眼科剪分别在小鼠左后、右后肢外上方皮肤剪开约1cm切口,将肿瘤块按每只小鼠双侧翼各2个点位进行皮下移植。用眼科镊将肿瘤块分别推送至左后肢内外侧、右后肢内外侧皮下,闭合手术切口。
4.生长曲线:皮下接种移植的肿瘤,每周定期测量肿瘤最长瘤径( a)和最短瘤径( b) ,计算肿瘤体积,肿瘤体积以公式(V) =瘤体最大内径x瘤体最小内径/2进行计算,并绘制肿瘤生长曲线。待肿瘤长至800~1 000 mm'大小时进行组织传代。
5.苏木素-伊红(HE)染色:取材获得的肿瘤组织经过10%福尔马林固定24h后进行石蜡包埋。肿瘤组织按照厚4 μm进行组织切片,用于HE染色。PDX传代肿瘤切片HE染色结果经过病理学家进行与原代肿瘤的比对。
6.免疫组织化学染色:切片常规脱蜡至水,进行过氧化氢封闭处理后使用乙二胺四乙酸( EDTA)修复液进行10~15 min的抗原修复。在经过10~ 15 min血清封闭处理后滴加-抗孵育过夜。使用PBS清洗切片并滴加相应种属的:二抗。再次清洗切片后滴加显色剂并在显微镜下观察切片显色程度，显色适宜时，使用自来水充分冲洗切片,并进行复染,脱水,透明,封片操作完成染色。
7.统计学方法:应用SPSS 22. 0统计软件分析,不同参数的肿瘤成瘤率分析方法为Fisher 和x检验。以P<0.05为差异有统计学意义。
此文字最终解释权归河南宜慧康科技有限公司所有：详情请咨询河南宜慧康科技有限公司。
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