实验大鼠开口器的生产厂家有哪些？
来源： |发布时间：2021-05-06 14:33|点击:次
MPTP诱导帕金森模型实验大鼠开口器的血液学及临床病理评价
帕金森病(Parkinson,Sdisease，PD)是继阿尔兹海默症后的第二常见的神经退行性疾病。PD的主要临床特征为运动障碍，其中包括静止性震颤、运动减少、迟缓、肌强直和姿势步伐不协调等。主要病理特征为黑质致密部多巴胺(dopamine，DA)能神经元细胞的变性死亡，导致黑质一纹状体通路退化，从而使纹状体内的多巴胺含量明显减少，黑质残存的神经元胞质内出现嗜酸性包涵体，即路易小体(Lewybody，LB)。
随着对PD发病机制的进一步研究，人们逐渐对PD有所认识，PD动物模型的研究也在不断发展。最常用的方法是利用神经毒素MPTP建立PD动物模型，其无论是在神经病理特征或运动行为方面都与人类PD酷似。MPTP不具有神经毒性，使用后出现PD症状的原因是MPTP在B型单胺氧化酶(MAO—B)的作用下转化为MPP+，随后由多巴胺转运体(dopaminetransporter，DAT)转运进入神经细胞，在神经细胞中形成自由基对黑质纹状体进行破坏，导致多巴胺(DA)含量减少。
因此，本研究利用MPTP建立PD实验大鼠开口器模型，期望能从血液学及病理学角度揭示PD发病机制，为临床诊疗提供依据。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1试验动物SPF级雄性SD实验大鼠开口器，体重280--320g，10～12周龄[成都达硕实验动物股份有限公司，许可证号：sCxK(川)2015一030]。
1.1.2仪器及试剂主要仪器：RM2235石蜡切片机、DMl000徕卡显微成像系统。主要试剂：1一甲基一4一苯基一1，2，3，6四氢吡啶、乙醚、苏木素染液、兔抗大鼠酪氨酸羟化酶。
1.2方法
1.2.1大鼠分组及PD模型制作挑选出爬杆试验得分为0分的大鼠16只进行试验，随机抽取6只作为对照组，10只作为模型组。将MPTP用生理盐水配制成质量浓度为30g／L的溶液，以30mg／kg进行腹腔注射，1次／d，连续注射7d，第7天注射结束1h后立即用爬杆实验的方法对大鼠进行筛选，评分在1．5～2．0分的视为PD模型制作成功的大鼠，并在第14天再次进行行为学检测，判断模型稳定性。
1.2.2行为学检测1)旷场试验：将实验大鼠开口器在开阔箱的正中格内，5min内观察大鼠的活动行为。测定的指标包括：①方格间穿行次数(3只爪以上跨人邻格的次数)；②竖起次数(两前肢离地1cm以上的次数)；2)爬杆试验：爬杆试验使用直径为35Fnm、高1000mm的光滑不锈钢管，将不锈钢管垂直竖立，使大鼠头向下放置在不锈钢管杆的顶部，让大鼠从金属杆顶部沿着杆自然爬至杆底，在大鼠下行时观察其行为，按照评分标准进行计分，每只大鼠爬杆两次，最终计算平均分。爬杆实验评分标准如下：四肢并用，一次顺利从杆上爬下为0分；一步一步螺旋向下爬行但兼有后肢滑行行为的为0.5；上杆后问歇停顿数次后趴下，但可抱紧金属杆为1分；滑行后掉落为1.5分；不能抓杆，直接掉落为2.0分。
1.2.3样品采集对实验大鼠开口器禁食8h，不禁水。乙醚麻醉后进行腹主动脉采血，随后断颈取脑，放人4％多聚甲醛固定1周。
1.2.4血液学检测用采集的血液处理后进行血生化和血常规指标测定。
1.2.5大鼠黑质病理检测1)HE染色：石蜡包埋后切片，选黑质部组织切片常规脱蜡至水，苏木素和伊红染色，中性树胶封片。显微镜下观察组织病理学变化。(2)免疫组化检测：选黑质部组织切片常规脱蜡至水，抗原修复后用山羊血清封闭，滴加一抗后4℃过夜。次日，磷酸缓冲盐溶液(PBS)洗3次后滴加二抗，PBS洗后使用DAB试剂盒显色；最后苏木素复染、脱水、透明及封片。
1．3统计学方法
采用EXCEL建立数据库，利用SPSS20.0统计软件进行统计分析，对行为学的结果应用单因素方差分析，对血液学结果应用独立样本t检验进行分析，定量资料以(z±s)表示，检验水准a除特别说明外均设定为0.05。实验大鼠开口器。
此文字最终解释权归河南宜慧康科技有限公司所有：详情请咨询河南宜慧康科技有限公司。
