进口小鼠固定架怎么使用的？
来源：未知 |发布时间：2021-06-24 14:44|点击:次
材料和方法
1、受试者
本研究所用的动物是来自中国河南省的圈养繁殖的棕色田鼠∶光暗循环10次，温度维持在23℃℃±2℃光照维持在200℃，水、胡萝卜和标准兔周（西安交大实验动物中心，在每个笼子里都可以免费获得。
棉毛和刨花作为筑巢材料，每周更换。田鼠与父母和兄弟姐妹被关在传统的塑料笼中（l×w×h、44厘米×22厘米×16cm）直至断奶。出生日分配PND0（出生日=第0天）。在PND第21天，将幼崽断奶并放入标准塑料笼中，与同窝动物一起饲养至PND60（每笼2个雌性同胞）。所有实验对象均为性幼稚的成年雌性。所有程序均由机构动物审查陕西师范大学护理与使用委员会，小鼠固定架，并遵照中国实验动物的护理和使用指南。
2.2CPP试验
位置偏爱调节发生在一个由两个较大的侧隔室（l）组成的三腔装置中×w×h、34厘米×25厘米×32厘米）由一个较小的中间隔室（l×w×h、11厘米×25厘米×32cm），两个较大的隔室有不同的视觉线索，一个隔室有灰色的壁（灰色室），另一个隔室有黑白条纹壁（条纹室），中间隔室作为适应室，灰色壁有7cm×底座中心9厘米的门。
2.2.1实验一：可卡因与不同情境同伴互动的CPP测试
预试验：在预处理前一天，对所有动物进行试验，以确定其对较大侧腔的先天性个体偏好。将动物（n=12）首先暴露于CPP装置的每个球杆装饰腔中。用70%乙醇清洁装置，并在两次试验之间让其干燥。试验期间试验中，小鼠固定架用数码摄像机记录10分钟适应期后在每个试验室中所花的时间15分钟，然后由实验盲评员使用观察者9.0（荷兰瓦赫宁根Noldus信息技术公司）进行评分。
偏好数据的分析要么独立于初始偏好，要么与初始偏好相关带着这样的偏爱，我。哦这两种方法在CPP研究中都是常用的，而后者在偏倚范式中更为常见（Orsini等人，2005）。我们发现雌性文田鼠对这两种分类都没有固有的偏好。
可卡因调节：盐酸可卡因
本实验采用生理盐水稀释的方法，在田鼠尾侧背侧皮下注射20mg/kg可卡因或生理盐水，根据可卡因对雌性文田鼠CPP和运动的影响，选择可卡因的剂量（Wang等人。在笼子外用皮手套短时间地抱着田鼠，并按摩注射部位。小鼠固定架由于田鼠经常被处理，它们很好地适应了这一过程。雌性（n=8）在同一天注射可卡因或等量的生理盐水进行调节，持续5天连续4天。
早上，受试者被放置在一个外腔中，注射生理盐水；下午，将受试者放置在相对的试验室中，并注射可卡因。受试者每疗程接受2小时的条件调节。上午疗程和下午疗程至少相隔6小时，以便有时间清除可卡因（Thieletal，2008）。因此，小鼠固定架我们提供了四对生理盐水和可卡因的关联配对可卡因：每天两次，交替平衡，持续4天。
试验后：在最后一次条件反射试验后24小时进行CPP试验，将受试者置于CPP装置的中间（中性）隔室中，使其在三个隔室之间自由移动。对处于无药物和无盐水状态的受试者进行15分钟的试验。
可卡因CPP的持久性：试验后，将经过训练的动物在家中笼中长时间不受干扰，然后在试验后第7天、第14天和第21天，在无药物和无盐水状态下间歇性地检测CPP的表达。试验后的一天被视为间隔第0天（试验后的一天=间隔第0天）。
可卡因与同龄人的调节：我们比较了同龄人和可卡因的相对强化强度。小鼠固定架在不同的室中注射20mg/kg可卡因和呼气生理盐水2h。调节过程和试验后程序与上述相似。实验对象为分配到三组中的一组（每组8人）：（1）受试者接受可卡因治疗，而一个熟悉的女性同伴是受试者在笼子里的女性兄弟姐妹，受试者与同一个二元同伴共四次发作；（2）受试者习惯于吸食可卡因，而不熟悉的女性同伴以前没有接触过受试者，且与受试者年龄大致相同；（3）受试者接受可卡因治疗，而不熟悉的男性同伴以前没有遇到过受试者，而且性取向幼稚，年龄与受试者大致相同。对于第（2）组和第（3）组，为了确保刺激动物的新颖性，我们通过将受试者与受试者配对，在每个条件作用日更新刺激田鼠每集都有一个陌生的同伴。
试验后和与熟悉雌性同时条件作用时可卡因-CPP的持久性：试验后按上述方法进行。小鼠固定架由于雌性田鼠在与熟悉雌性同时条件作用时表现出明显的可卡因偏好，因此，可卡因-CPP的持久性按上述方法进行间歇性试验。
2.2.2实验二：不同情境同伴配对OT对可卡因CPP的影响
在前期实验的基础上，对OT治疗对条件性反应的影响进行了评价，证实了外周OT能有效地影响包括亲缘关系在内的多种行为和生理反应（Cushing和Carter，19992000；Ｒazzoli等人，2003年），女性受试者（每组8名）接受可卡因治疗，小鼠固定架而同龄人则接受腹腔注射稀释于0.9%氯化钠溶液（1mg/kg）中的OT（03251，Sigma-Aldrich，USA）治疗；0.5mg/mL），连续4天。OT剂量的选择基于先前的研究（Carson等人，2010）。
2.3统计分析
数据的正态性采用单样本Kolmogorov-Smirnov检验
条件反射采用重复测量法进行分析，间歇日为重复测量值。如果发现可卡因与试验日之间存在显著的交互作用，则采用配对样本t检验来检验受试者在每个时间点内间歇试验所花费时间的差异。采用双因素方差分析来分析确定受试者服用可卡因与同伴调节后的时间是否存在显著差异。如果发现显著差异，则使用Fisher最小显著性差异进行事后测试。所有数据均以平均值表示±标准误差（SE）和α设置为0.05。小鼠固定架。
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