小鼠固定架的临床使用方法
来源： |发布时间：2021-06-15 10:54|点击:次
统计学分析
采用SPSS20.0软件进行统计学分析,计量资料比较,满足方差分析条件者,采用单因素方差分析(One-wayANOVA),两两比较用SNK法;若不满足方差分析条件者,采用多个独立样本的非参数检验(Kruskal-WallisHTest)。实验数据以平均值±标准差(x-±s)表示,以P<0.05为差异具有统计学意义,使用GraphPadPrism5.0对数据处理作图。
2结果
2.1小鼠阴道脱落细胞学观察
小鼠动情周期为4~5d,具有规律的性周期,动情前期:圆形或椭圆形的有核上皮细胞为主,夹有少量角化细胞和白细胞;动情期:几乎全是无核的角化细胞;动情后期:角化细胞减少,出现有核上皮细胞和白细胞；动情间期:细胞少而皱缩,白细胞为主。不同动情周期小鼠阴道脱落细胞涂片(美蓝染色)。在内膜种植当日小鼠动情周期较一致,处于动情前期。
2.2种植物形态学观察
小鼠腹腔子宫内膜异位灶大多数生长在肠系膜上,其次为脾下、腹壁、子宫附近,与周围组织轻中度粘连。异位灶为囊性不规则形态,有的呈半透明色,有的呈暗红色,囊内含淡黄色或半透明液体,囊壁表面有细小血管形成,囊壁边缘有少量结缔组织,病灶直径范围1~10mm不等,造模后1周即见典型的子宫内膜异位灶,造模成功率为100%。组织病理学观察种植物可见生长良好的腺体和间质,腺体数目较正常在位子宫内膜明显减少,囊腔内可见炎性细胞。
2.3种植物体积比较
随着造模时间的延长,EM模型小鼠腹腔种植物数量无明显变化,但体积呈先增大后缩小再增大的趋势,其中造模后2周较造模后1周体积显著缩小,差异具有显著性(P<0.05);造模后4周、造模后6周种植物体积与造模后2周比较再次增大,造模后4周与造模后1周种植物体积比较,差异不具有显著性(P>0.05);造模后6周与造模后1周种植物体积比较,差异具有显著性(P<0.05)。假手术组小鼠腹腔脂肪组织稍有增多,均未见明显腹腔种植物。
2.4腹腔粘连评分
随着造模时间的延长,假手术组(对照组)不同时间点的小鼠腹腔粘连评分比较,差异不具有显著性。模型组小鼠腹腔粘连程度有逐渐加重趋势,与造模1周的小鼠腹腔粘连评分相比,造模后2周、4周、6周的小鼠腹腔粘连评分均有显著性增加(P<0.05,P<0.001,P<0.001),造模后6周的小鼠腹腔粘连评分最高。
2.5腹腔灌洗液TGF-β1表达
ELISA检测结果显示,假手术组(对照组)小鼠腹腔灌洗液TGF-β1表达水平在腹腔注射后不同时间变化不显著(P>0.05)。模型组小鼠腹腔灌洗液TGF-β1表达水平在造模后呈先升高后降低再升高的趋势,其中造模后1周较造模当日TGFβ1表达水平显著升高(P<0.05),造模后2周较造模后1周TGF-β1表达水平有轻度降低,造模后4周到6周TGF-β1表达水平再次显著性升高(P<0.05)。
2.6种植物Masson染色
Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,细胞核呈黑褐色,显微镜下观察种植物胶原纤维沉积明显,随着造模时间的延长,胶原纤维沉积有增多趋势。
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