小鼠固定架在临床实验上的使用
来源：未知 |发布时间：2021-04-01 09:18|点击:次
单次大剂量X射线照射建立小鼠放射性口腔黏膜炎模型的实验研究
放射性口腔黏膜炎是头颈部恶性肿瘤在放射治疗中最常见的不良反应，临床发生率高达80%。
ROM的临床发展导致溃疡及溃疡面融合，继而发展成舌黏膜坏死和可能的继发性感染,最终导致舌黏膜纤维化和(或)重建修复。舌黏膜溃疡性损伤可导致疼痛和吞咽困难,造成患者饮食受限、脱水和体质量减轻;局部和全身的继发性感染会增加患者住院时间降低其生活质量;ROM的发生,还可能限制放疗剂量,延误肿瘤治疗时机，严重时影响原发病的治疗,近年来,由于临床上ROM的高发生率,其防治研究逐渐引起人们的重视。
ROM的造模方式多种多样,由于小鼠的经济性和操作便利性,成为放射性ROM模型的主要研究对象。现有的小鼠ROM模型一般采用X射线、Cooγ射线进行小鼠头颈部局部照射,其造模方式大致分为低剂量分割照射和高剂量单次照射。由于放射剂量不一，小鼠种类不同,射线种类和屏蔽方式也存在差异,最终报道的有效剂量为15~36 Gy,炎症周期在2~5周不等。
因此,建立一个稳定的、特异性的ROM小鼠模型,将有助于揭示ROM发生、发展的病理过程,对ROM的发病机制和防护药物研发具有重要意义。C57BL/6J小鼠是实验室最常见的小鼠品系之一,对放射性损伤有--定抵抗力,是造血系统和肠道放射损伤的常用评价模型。本研究采用单次大剂量X射线局部照射C57BL/6J小鼠,系统评价建立ROM模型,揭示引发小鼠ROM的有效照射剂量范围和模型损伤致死效应规律,通过舌黏膜厚度和角化上皮细胞增殖能力检测,量化照射引起的舌黏膜上皮损伤,为进一步ROM模型的防治研究提供评价指标。
1材料与方法
1.1实验动物及分组.
SPF级C57BL/6J雄性小鼠共55只,体质量22~24g。小鼠适应性饲养5d后随机分为正常对照组,15、16、17和18Gy照射组,每组11只,其中8只用于观察照后30d存活和体质量变化,另外3只于照后9d活杀,取舌进行组织病理学观察。灭菌水和维持饲料供其自由采食。保持每日开灯12h,关灯12h循环,动物饲养设施合格证号SYXK-(军)-2007-004。
1.2 实验仪器
RS-2000X射线机;KD-TS1A型生物组织自动脱水机,KD-BM、BL生物组织冷冻包埋机,KD-P型电脑生物组织摊片机及KD-P型电脑生物组织烘片机。RM2235型轮转式切片机。DP72型荧光倒置显微镜。
1.3 实验试剂
小鼠Ki67抗体,苏木素、伊红染液,多聚甲醛、水合氯醛。
1.4 照射方法
照射组小鼠照射前腹腔注射4%水合氯醛溶液0.2ml/只,正常对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水。照射组小鼠麻醉后仰位置于自制照射盒,铅板放置于颈部以下完全屏蔽小鼠其他部位，将鼠舌牵拉出口外,避免窒息死亡,头颈部置放射源接受一次性照射,照射剂量率为1.325Gy/min(电压220kV,电流25 mA)。
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